人源锌指蛋白ZNF24及其锌指结构域的表达、纯化及DNA结合性质的研究
作者:苏晓琴; 高宝才; 纪锐; 王森; 李继喜
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转录因子是调节基因表达的关键蛋白质,能够以序列特异性的方式与基因结合。ZNF24是el-like锌指转录因子Krpp家族的一员。它在细胞增殖和分化中起重要作用。它可以促进肝癌细胞的增殖,抑制神经细胞的分化。ZNF24蛋白的N端含有SCAN结构域区,C端含有锌指区,由四个串联的C2H2蛋白组成。Znf24可以特异性识别和结合基因启动子,参与基因表达调控,但其功能的具体分子机制尚不清楚。在本文中,我们成功地在大肠杆菌中表达了全长的人锌指蛋白ZNF24和它的锌指结构域ZNF24(243~368)。Znf24全长蛋白在溶液中以三聚体的形式存在,而锌指结构域是溶液中的单体,表明Znf24蛋白N端的SCAN结构域可以促进全长蛋白的寡聚。凝胶迁移实验验证了znf24全长蛋白和锌指结构域蛋白与双链DNA底物的结合能力,为进一步研究锌指蛋白ZNF脉24个受调控基因的表达提供了理论基础。相关结果表明,SCAN可能代表了一种新的转录活性调节机制。