脂肪干细胞携载汉黄芩苷聚己内酯-聚乙二醇胶束的制备
背景:汉黄芩苷已被证明具有抗炎、神经保护等药理活性,但其半衰期短,难溶于水,溶于有机溶剂后有较大的不良反应。研究发现,聚己内酯-聚乙二醇可以结合高度疏水性的药物,解决药物不溶性问题,达到缓释效果,但不能准确到达受损部位。在形成胶束后,它们可以穿透细胞膜,因为它们的尺寸很小。目的:在脂肪干细胞携载汉制备汉黄芩苷聚己内酯聚乙二醇胶束和黄芩苷聚己内酯聚乙二醇胶束,以解决汉黄芩苷难溶和半衰期短的问题,使药物到达受伤部位。方法:在透析法制备汉黄芩苷聚己内酯聚乙二醇胶束并进行表征。检测了包封率、载药量和体外的药物释放率。在SD大鼠、脂肪干细胞和流式细胞术,通过免疫组织化学和免疫荧光检测CD90、CD44和CD45的表达。在脂肪生成诱导14天后进行油红O染色。CCK-8方法检测汉黄芩苷聚己内酯聚乙二醇胶束对脂肪干细胞的毒性。香豆素6和汉黄芩苷的胶束与脂肪干细胞共同孵育用于细胞定位。结果与结论:(1)汉黄芩苷聚己内酯-聚乙二醇胶束平均粒径为(26.70.4)nm,Zeta电位为(-33.20.3)MV,外观相对均匀。(2) 汉黄芩苷聚己内酯-聚乙二醇胶束包封率为(90.22.04)%,载药量为(9.180.31)%。(3) 24小时内自由汉黄芩苷的累积释放率为98%,汉黄芩苷聚己内酯聚乙二醇胶束的96小时累积释放率为87%。(4) 流式细胞术、免疫组织化学和免疫荧光显示,表面标记物CD90和CD44在脂肪干细胞高度表达,但在CD45几乎不表达。脂质诱导后,油红O染色显示脂滴为红色。(5) CCK-8表明,当胶束的质量浓度为10-200 mg/L时,它对脂肪干细胞无毒。(6) 激光共聚焦显微镜观察表明,香豆素6和汉黄芩苷聚己内酯的聚乙二醇胶束可以进入脂肪干细胞和线粒体。(7) 结果表明,汉黄芩苷聚己内酯聚乙二醇胶束可以进入脂肪干细胞,脂肪干细胞可以进入携载汉-黄芩苷聚己内酯聚乙二醇胶束。