目的：基于质谱分析-网络药理学预测-活性验证的综合研究思路，分析牛黄解毒丸潜在的抗炎机制和活性成分。方法：采用高分辨率质谱仪对牛黄解毒丸化学成分进行分析。使用中药生物信息学分析工具（AristoleTCM）搜索分析的成分，寻找相应的目标。以“inflammation”为关键词，使用人类孟德尔基因数据库（OMIM）获得炎症相关靶点。将组成目标和疾病目标进行交叉，利用蛋白质-蛋白质互动（PPI）数据库（STRING）分析PPI境内的共同目标，并使用Cytoscape软件对目标进行进一步筛选，以获得核心目标。利用生物信息分析工具（DAVID数据库）对核心目标的京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路进行了丰富和分析，构建了药物－成分－靶标－通路网络图。通过与AutoDock4.2.6软件（PTGS 2）的分子对接验证了关键靶点和相关药物分子。该靶点及其相应的化学成分在体外得到了验证。结果：采用高分辨率质谱仪分析了牛黄解毒丸地区的236种成分，对应456个靶点、158个炎症相关靶点和21个交叉靶点。经过PPI分析和网络拓扑分析，获得了11个核心目标和14个活性组分，涉及肿瘤坏死因子（TNF）、核因子B（NF-B）、Toll样受体（TLR）和趋化因子等27条途径，分子对接结果显示PTGS2、白细胞介素－1（IL－1），白细胞介素－13（IL-13）和C－C基序趋化因子配体2（CCL2）与其相应的组分如大黄酸、虫胶D和齐墩果酸具有高结合活性。在体外活性实验中，大黄酸对其相应的PTGS2靶点具有良好的抑制作用。结论：本研究构建了牛黄解毒丸的抗炎调节网络，分析了牛黄解毒丸的抗炎活性成分和作用机制，发现大黄酸对作为抗炎靶标的PTGS2具有良好的抑制作用。