lncRNA CASC2对结直肠癌细胞功能及血管生成的影响

作者:陈函; 罗晓勇; 李朝萍; 郭彩茹; 鞠文翠; 翟秧秧; 师鑫鹏
更新时间:

目的研究lncRNACASC 2过表达对结直肠癌细胞增殖、迁移、血管生成和增殖的影响。方法在PCR、qRT-检测正常结肠组织(上皮细胞(NCM460)和结直肠癌细胞株(DLD-1、HT29、SW620、HCT116、RKO、LOVO、SW480)中lncRNACASC2号的表达。HCT116和SW480细胞建立稳定转染细胞系,分为对照组和lncRNACASC2号高表达组。QRTPCR验证了稳定转基因菌株中lncRNACASC2号的水平。CCK-8实验、Transwell实验和划痕实验分别检测细胞增殖水平和迁移能力。收集对照组和lncRNACASC 2过表达组的细胞上清液,提取外显体,将对照组和lncRNACASC 2过表达组的外显体分别与HUVEC细胞孵育,用3D Matrigel方法检测其对血管生成的影响,并测量细胞中Wnt16、FZD7和catenin的蛋白质水平。结果lncRNA CASC 2在7株结直肠癌细胞株人结肠上皮细胞中的表达明显低于正常结肠上皮细胞NCM460。与对照组相比,lncRNACASC 2过表达显著抑制HCT116和SW480细胞的增殖和迁移(P<0.01)。3D基质凝胶分析显示,SW480CASC2组和HCT116CASC2组的外显体显著抑制HUVEC肾小管细胞的形成(P<0.01)。Western blot的结果显示,在lncRNACASC2号过度表达后,Wnt16、FZD7和catenin的蛋白质水平降低(P<0.01)。结论lncRNACASC2在结直肠癌细胞中表达下调。lncRNACASC2号的过度表达可以抑制Wnt/FZD/-catenin信号通路和结直肠癌细胞的增殖和迁移,并减少血管生成。