目的探讨人宫颈癌干细胞（CCSCs）的分离、培养和鉴定方法，以及CD44和CD24号对其生物学特性的影响。方法选择2017年1月至2018年2月武警四川省总队医院妇科住院的32例宫颈癌患者为研究对象，收集其宫颈癌组织作为实验组。另选择32例子宫全切术患者，将其正常宫颈粘膜组织作为空白组。蛋白酶消化结合体外细胞培养，在流式细胞术对细胞进行分类，并将其分为CD44＋CD24＋组组、CD44－CD24组和对照组。通过四甲基偶氮唑盐（MTT）法和平板集落形成实验检测细胞的增殖能力。使用24只年龄在4至6周的雄性BALB/C裸鼠。将CD44＋CD24＋细胞和CD44－CD24细胞移植到裸鼠腋窝内，观察其成瘤率。端粒酶活性是由端粒重复扩增（TRAP）和电泳法共同确定的。结果实验组CD44＋和CD24+阳性细胞比例高于空白组（P<0.05）。CD44＋CD24＋组细胞的体外增殖活性高于对照组和CD44－CD24－组细胞（P<0.05）。CD44+CD24+组端粒酶相对表达强度高于对照组，CD44-CD24+组端粒酶相对表达强度低于对照组（P<0.05）。CD44+CD24+组肿瘤形成时间早于对照组，肿瘤形成率高（P<0.05）。结论CD44和MORDOVA是人ccscs的可行表面标记分子，获得的CD44＋CD24＋细胞能显示肿瘤干细胞的生物学特性。