冠突曲霉Ac-nsdD基因鉴定分析及抗盐胁迫功能分析
作者:余春芳; 曹广鑫; 张亭笛; 吴炅臻; 杨靖; 谭玉梅; 刘永翔; 刘作易; 位秀丽
更新时间:
[目的]进一步探讨GATA转录因子Ac-nsdD在茯砖茶冠突曲霉中的调节作用。[方法]根据基因组注释和系统发育分析结果对冠突曲霉Ac-NsdD蛋白序列进行分析。利用同源重组和根癌农杆菌介导的方法构建Ac-nsdD基因敲除突变体,并对突变体的表型进行分析。[结果]根据对基因组注释结果的分析,冠突曲霉Ac-nsdD编码了一个假设的转录因子,该转录因子与结构域和ZnF的GATA保守结合。系统发育分析表明,ACnsdD与NsdD有密切的亲缘关系,NsdD与其他真菌有同源性。通过进一步使用同源重组的方法,获得了该基因敲除的突变体。与野生型菌株相比,在M3Y培养基培养的突变体在闭囊壳的产量显著下降。然而,在5%的NaCl M3Y培养基,突变体产生的闭囊壳较少,分生孢子显著增多,显著增加了中间培养中黑色色素的形成,并降低了生长速度。在17%的NaCl M3Y培养基,突变体显示闭囊壳几乎为零,分生孢子量变更少,增长率下降。[结论]AC-nsdD基因可能激活无盐环境下的性发育。在低渗透盐胁迫下,该基因可能激活性发育并抑制无性发育,平衡性发育和无性发育,并参与色素生物合成。在高渗盐胁迫下,它可以激活性发育、无性发育和营养生长。本实验旨在进一步研究Ac-nsdD基因相偶联丝状真菌的一些信号途径及其下游基因,为丝状真菌有性和无性发育的一些常见和独特的信号转导途径提供实验室数据。